奧林巴斯共聚焦顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)化操作流程拆解
(一)開機(jī)與初始化 依次開啟顯微鏡主機(jī)、激光器控制器和電腦,啟動專用軟件進(jìn)行系統(tǒng)初始化。激光器需預(yù)熱至光強(qiáng)穩(wěn)定,此過程通常需5-10分鐘,預(yù)熱不充分可能影響成像質(zhì)量。將樣品平穩(wěn)置于載物臺,小型樣品需用樣品夾固定,避免掃描時位移。對于鋰電池集電器等大面積樣品,可利用水平拼接功能擴(kuò)大觀測范圍,無需裁剪預(yù)處理。
根據(jù)樣品特性選擇激光波長(如熒光材料可選 405nm 激光),通過物鏡轉(zhuǎn)盤切換 5×-100× 倍率鏡頭,注意避免鏡頭觸碰樣品。在軟件中調(diào)節(jié)激光功率與探測器增益,防止信號飽和或過弱,再通過自動或手動對焦定位觀測區(qū)域。
先以低分辨率快速預(yù)覽,確定感興趣區(qū)域(ROI)后,設(shè)置掃描范圍、分辨率及 Z 軸切片參數(shù)。采集完成后,利用軟件工具進(jìn)行二維測量或三維重建,計算 Sa、Sz 等粗糙度參數(shù)并生成報告。
先將激光功率調(diào)至低,關(guān)閉激光器,再依次關(guān)閉軟件、電腦和主機(jī)電源。需記錄本次使用的物鏡型號與激光參數(shù),便于后續(xù)實驗復(fù)現(xiàn)。
使用后用吹氣球清除載物臺與物鏡表面浮塵,頑固污漬需用專用鏡頭紙蘸乙醇混合液輕輕擦拭,嚴(yán)禁用手觸摸光學(xué)元件。鏡頭接口處需定期清潔,避免灰塵影響成像精度。
設(shè)備需放置在清潔、干燥、無振動的環(huán)境中,避免陽光直射。建議將溫度控制在 20-25℃,濕度保持 40%-60%,穩(wěn)定的溫濕度能維持光學(xué)元件性能與校準(zhǔn)精度。
每月檢查載物臺移動平滑度,每季度用光柵標(biāo)準(zhǔn)樣板驗證測量準(zhǔn)確性。物鏡需按使用頻率每半年至一年進(jìn)行專業(yè)校準(zhǔn),確保數(shù)據(jù)可靠。
若出現(xiàn)圖像模糊,可先檢查物鏡清潔度并重新對焦;若激光信號異常,需確認(rèn)激光器預(yù)熱狀態(tài)并聯(lián)系專業(yè)工程師檢修,切勿自行拆卸主機(jī)。
奧林巴斯共聚焦顯微鏡標(biāo)準(zhǔn)化操作流程拆解